在日常的液相色譜(HPLC)分析中,色譜柱是實驗室中最寶貴的“消耗品"。正確的清洗與保管方法,不僅能延長色譜柱的使用壽命,還能幫助我們避免許多常見的分析問題。今天,就讓我們一起來了解色譜柱的維護要點吧!
一、 為什么要清洗色譜柱?
1、避免柱效下降:緩沖液、離子對試劑、酸等成分容易殘留在柱內,若不清洗會加速柱子老化。
2、防止分析問題:如壓力升高、峰形異常、鬼峰(Ghost peak)出現等,很多情況下都與柱內雜質沉積有關。
因此,當使用可能導致柱劣化的流動相時,必須進行清洗!
二、 日常使用時的清洗方法
1、使用相同成分且不含可能導致變質的成分(緩沖液、離子對試劑、酸等)的流動相清洗 15至30 分鐘。
2、如果長期存放,請更換為出廠時使用的流動相。
例如使用 甲醇/20 mmol/L 磷酸緩沖液 = 20/80 的條件時,可以這樣操作:
1) 用 甲醇/水 = 20/80 清洗約 15 分鐘。
2) 若一周內繼續使用,密封保存即可。
3、若一周以上不使用,需切換到出廠時的保存溶液(甲醇/水 = 70/30,再密封保存。
這樣做能確保柱子在下次使用時狀態穩定。
三、 出現問題時的清洗方法
用可溶解任何吸附雜質或沉淀樣品/鹽的溶劑清洗 30 至 60 分鐘。 請勿使用堿性溶液或強酸,因為它們可能會損壞色譜柱。
1、疏水性化合物吸附:
先用甲醇清洗 30 分鐘;若無改善,再嘗試更強的溶劑(如 THF、氯仿)。
2、鹽析出現:
先用純水沖洗 30 分鐘;再用甲醇/水體系清洗 15 分鐘。
注意:避免使用強酸或堿性溶液,以免損傷色譜柱。
四、 色譜柱的保管方法
1、短期保管:用分析時的流動相密封即可。
2、長期保管:建議換成出廠保存液(如 ACN/水 = 70/30)后再密封保存。
關鍵點:
1、使用有機溶劑濃度較高的條件保存,能有效防止微生物滋生。
2、每次停用前檢查是否需要清洗,避免因殘留緩沖液或酸性條件導致柱子損壞。
五、 總結
1、色譜柱是消耗品,但正確的清洗與保管能大幅延長壽命。
2、色使用緩沖液、酸性流動相時,一定要進行適當清洗。
3、出現問題時,選擇合適的溶劑進行針對性處理。
4、長期保存時,請使用推薦的出廠保存液。
讓我們一起養成良好的柱子維護習慣,讓每一次HPLC分析都更加順暢、高效!
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