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Waters色譜柱在安裝與使用時應注意什么?

更新時間:2025-07-21瀏覽:617次

Waters色譜柱的主要優勢是重現性好,此系列色譜柱使用高純度原料,經過嚴密控制的填料生產流程和色譜柱裝填技術,得到了市場上重現性好的高效液相色譜柱。

Waters色譜柱使用注意事項如下:

1、安裝與連接:

流向標識:

色譜柱通常標有流向箭頭,需按箭頭方向正確安裝,避免反沖。

連接管路需與色譜柱接頭匹配,避免因匹配不佳導致柱效下降或滲漏。

初始沖洗:

新色譜柱安裝前,需用純有機溶劑(如乙腈或甲醇)以低流速(0.1 mL/min)沖洗,再逐步提高流速至常規分析流速,以去除柱內雜質并避免氣泡進入檢測系統。

2、流動相與平衡

流動相兼容性:

更換流動相前,需確保新流動相與色譜柱內當前溶劑兼容。若流動相含緩沖鹽,需先用5倍柱體積的水/有機溶劑混合液沖洗,再引入緩沖流動相。

避免流動相中鹽濃度過高時直接使用高比例有機相,以防鹽析出導致色譜柱堵塞。

平衡時間:

反相色譜柱需用至少10倍柱體積的流動相平衡,直至壓力與基線穩定。

3、操作條件控制:

壓力與流速:

避免壓力急劇變化,調節流速時應緩慢進行。流速需根據色譜柱規格調整,避免超過色譜柱的*大允許壓力。

溫度管理:

避免溫度循環變化,柱溫升高可降低系統壓力,但不宜通過提高柱溫過度降低壓力。

pH范圍:

反相色譜柱推薦pH范圍為1-12,但極*pH條件(如pH≥8)會加速鍵合相水解和硅膠溶解,需降低使用溫度并縮短操作時間。

4、樣品處理

樣品凈化:

樣品中的雜質是色譜柱污染的主要來源。建議使用固相萃取(SPE)小柱或超臨界流體萃取(SFE)系統對樣品進行凈化。

樣品需用0.2 μm濾膜過濾,確保濾膜材料與樣品溶劑兼容,避免濾膜溶解污染色譜柱。

溶劑選擇:

樣品溶劑需與流動相兼容,避免進樣后發生沉淀或溶劑不互溶。建議使用流動相或比流動相洗脫強度弱的溶液溶解樣品,以獲得優異峰形和檢測靈敏度。

 

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